CRISPR/Cas9基因編輯技術平臺

CRISPR/Cas9基因編輯系統 CRISPR/Cas9 (Clustered Regularly Interspaced Short Pal indromic Repeats)是最新出現的一種由sgRNA指導Cas9核酸酶對靶向基因進行特定DNA修飾的技術。CRISPR/Cas9靶向基因組編輯系統由內切核酸酶-Cas9 和指導RNA-gRNA兩部分組成。Cas9/gRNA復合物特異性識別DNA靶點，切割雙鏈DNA的活性結構域，使得雙鏈DNA斷裂。 CRISPR/Cas9系統產生雙鏈缺口后一般采用非同源末端連接（NEHJ）或同源定向修復（HDR）對含缺口的雙鏈DNA進行修復。NHEJ修復途徑是一種錯誤傾向修復機制，用于在缺少修復模板的情況下修復斷裂的雙鏈DNA，該途徑主要用于CRISPR/Cas9系統介導的基因沉默。同源性定向修復（HDR）途徑則是在引入同源性DNA模板的情況下，通過同源重組的方式將DNA模板精確地插入到編輯地基因組位點，從而實現對基因組特定基因位點進行精確編輯。